【集萃網(wǎng)觀察】1·酶固定化目的及意義

　　酶作為一種重要的生物催化劑，具有選擇性強(qiáng)、催化效率高、反應(yīng)條件溫和、底物專一、產(chǎn)物大多數(shù)無毒性及無污染等特點(diǎn)，符合綠色化學(xué)的要求.但酶在應(yīng)用中存在穩(wěn)定性差、不能回收重復(fù)利用等問題，因此，在20世紀(jì)60年代發(fā)展了酶固定化技術(shù).它通過化學(xué)或物理手段，用載體將酶束縛或限制在一定區(qū)域內(nèi)，使其進(jìn)行特有和活躍的催化作用.固定化酶具有貯存穩(wěn)定性高、易于控制、工藝簡便等優(yōu)點(diǎn)，在化學(xué)、生物工程、醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域得到了迅速發(fā)展.[1]

　　2·酶固定化方法

　　固定化酶的性能是由酶固定化方法和固定化酶所使用的載體材料性質(zhì)共同決定的，它們之間的交感作用使固定化酶具有獨(dú)特的物理化學(xué)和動(dòng)力學(xué)性質(zhì).傳統(tǒng)的酶固定化方法，根據(jù)酶的性質(zhì)及用途可分為吸附法、交聯(lián)法、包埋法、共價(jià)結(jié)合法等.吸附法是最早出現(xiàn)的酶固定化方法，它是利用離子鍵、物理吸附等原理，將酶固定在纖維素、瓊脂糖等多糖類或多孔玻璃、離子交換樹脂等載體上.交聯(lián)法是利用雙功能或多功能交聯(lián)試劑，在酶分子和交聯(lián)試劑之間形成共價(jià)鍵，得到三向的交聯(lián)網(wǎng)架結(jié)構(gòu).根據(jù)使用條件和添加材料的不同，能夠產(chǎn)生不同物理性質(zhì)的固定化酶，常用的交聯(lián)試劑有戊二醛、偶氮聯(lián)苯胺-2，2′-二磺酸、1，5-二氟-2，4-二硝基苯、己二酰亞胺酸二甲酯等.包埋法是載體與酶溶液混合后，借助引發(fā)劑進(jìn)行聚合反應(yīng)，再通過物理作用將酶限定在載體的網(wǎng)格中，實(shí)現(xiàn)酶的固定化，它主要分為凝膠包埋法和微膠囊包埋法.共價(jià)結(jié)合法是通過酶蛋白分子上的官能團(tuán)與固相支持物表面上的反應(yīng)基團(tuán)之間形成化學(xué)共價(jià)鍵來固定酶，該法是目前研究最為活躍的一類酶固定化方法.酶固定的常用載體有天然高分子（纖維素、瓊脂糖、淀粉、葡萄糖凝膠、膠原及衍生物等）、合成高聚物（尼龍、多聚氨基酸、乙烯-順丁烯二酸酐共聚物等）和無機(jī)支持物（多孔玻璃、金屬氧化物等）.另外，通過輻射、光、等離子體等高新技術(shù)均可制備高活性固定化酶.[2-3]總之，酶固定化不管是通過物理作用，還是化學(xué)鍵結(jié)合，都必須選用合適的材料作為固定化載體.載體材料的性能直接影響固定化酶的催化活性.因此，酶的固定化載體材料必須具備良好的機(jī)械強(qiáng)度、熱穩(wěn)定性、化學(xué)穩(wěn)定性、耐生物降解性、對(duì)酶的高度親和性、較高的酶活等.[4]但任何一種固定化方法或固定化載體都不可能適用于所有酶，要想獲得較好的固定化效果，必須根據(jù)具體的酶種和催化反應(yīng)類型，選擇合適的固定化方法和載體.

　　3·固定化酶在紡織印染加工中的應(yīng)用

　　酶催化具有安全高效、環(huán)保節(jié)能的特點(diǎn)，生物酶可以替代傳統(tǒng)化學(xué)品完成生態(tài)型染整加工.另外，紡織纖維載體[如棉、蠶絲、大豆纖維、尼龍、絲素（膠）等]能以多種形態(tài)滿足不同需求，易于分離回收，無毒、穩(wěn)定、易得、價(jià)廉，更利于固定化酶的工業(yè)化生產(chǎn)；而以纖維材料為載體的固定化酶，不僅能開發(fā)生物活性材料，處理印染廢水，而且還以可賦予紡織品抗菌防污等特殊功能.[5]

　　3.1過氧化氫酶

　　過氧化氫酶（Catalase，簡稱CAT）是一種存在于所有好氧微生物和動(dòng)、植物細(xì)胞內(nèi)的氧化還原酶，能夠催化H2O2分解為H2O和O2.過氧化氫酶在紡織印染行業(yè)中主要應(yīng)用于雙氧水漂白后的生物除氧和氧漂廢水處理.[6]為了提高CAT在印染生產(chǎn)中的穩(wěn)定性，國內(nèi)外對(duì)過氧化氫酶的固定化及其應(yīng)用進(jìn)行了研究.陳軍[7-9]等以殼聚糖、棉織物和尼龍6等為載體，制備固定化過氧化氫酶，不僅使酶的酸堿、熱穩(wěn)定性和貯藏穩(wěn)定性提高，對(duì)外界不良環(huán)境有較強(qiáng)的抵抗能力，而且對(duì)空氣中的有害物質(zhì)及自由基具有吸附和清除作用；Costa等[10-11]利用無機(jī)材質(zhì)氧化鋁（礬土）經(jīng)戊二醛交聯(lián)固定過氧化氫酶，用于處理氧漂廢水，并回收用于染色加工.

　　3.2過氧化物酶

　　過氧化物酶（Peroxidase）屬氧化還原酶，廣泛存在于動(dòng)、植物及微生物中，是以過氧化氫或烷基過氧化物作為電子受體來催化氧化一系列底物的.[12]在紡織印染方面主要應(yīng)用于合成染料的脫色和印染廢水的處理等.近年來，國內(nèi)外研究最多的為辣根過氧化物酶和木素過氧化物酶的固定化.管文軍、蘆國營等[13-14]將過氧化物酶固定于尼龍66膜、聚丙烯酰胺和殼聚糖上，制備出具有更好使用特性的固定化酶.其中，固定化木素過氧化物酶對(duì)酸性大紅BS的脫色率在60%以上，而且共同固定的木素過氧化物酶和葡萄糖氧化酶對(duì)染料的脫色速率更高，第1min內(nèi)脫色率達(dá)90%左右.

　　3.3溶菌酶

　　溶菌酶（Lysozyme）存在于動(dòng)植物、微生物甚至噬菌體中.它是一種專門作用于微生物細(xì)胞壁的水解酶，全稱為1，4-β-N-溶菌酶，是一種有效抗菌劑，具有抗病毒、止血、消腫、鎮(zhèn)痛及加快組織修復(fù)等功能.[15]溶菌酶固定化后可用于產(chǎn)業(yè)用紡織品和抗菌功能紡織品的開發(fā).劉賢明等[16]將溶菌酶固定在人造纖維制成的HEPA空氣過濾高效濾材上，從而制得生物殺菌濾材，并將其作為空調(diào)的空氣凈化系統(tǒng)，開發(fā)具有高效除塵和殺菌功能的產(chǎn)業(yè)用紡織品.陳建龍[17]通過共價(jià)偶聯(lián)法和自組膜技術(shù)將雞蛋清溶菌酶和海洋低溫溶菌酶固定于玻璃纖維構(gòu)成的空氣過濾材料表面，結(jié)果表明:在干燥條件下，固定化溶菌酶可以儲(chǔ)存更長時(shí)間，且保持一定的熱穩(wěn)定性，固定化溶菌酶可以在氣相狀態(tài)下破壞金葡球菌細(xì)胞壁并將其殺滅.胡英俊[18]采用吸附法和戊二醛交聯(lián)法將溶菌酶固定在羊毛織物上，從而賦予羊毛纖維優(yōu)良的抗菌效果.